วัฒนธรรมบริสุทธิ์ในจุลชีววิทยาวัฒนธรรมห้องปฏิบัติการที่มีสิ่งมีชีวิตชนิดเดียว วัฒนธรรมบริสุทธิ์มักจะได้มาจากวัฒนธรรมผสม (หนึ่งที่มีหลายชนิด) โดยการถ่ายโอนตัวอย่างขนาดเล็กเข้าสู่สื่อใหม่การเจริญเติบโตที่ผ่านการฆ่าเชื้อในลักษณะที่จะกระจายแต่ละเซลล์ทั่วพื้นผิวกลางหรือโดยการทำให้ผอมบางตัวอย่างหลายครั้งก่อน สื่อใหม่ ทั้งสองวิธีแยกแต่ละเซลล์เพื่อที่เมื่อพวกมันทวีคูณแต่ละเซลล์จะก่อตัวเป็นอาณานิคมโดยสิ้นเชิงซึ่งอาจถูกนำมาใช้เพื่อฉีดเชื้อให้มากขึ้นด้วยการรับรองว่าจะมีสิ่งมีชีวิตเพียงชนิดเดียว การแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์อาจได้รับการเสริมด้วยการผสมเชื้อด้วยสื่อที่เอื้อต่อการเติบโตของสิ่งมีชีวิตหนึ่งไปสู่การแยกออกจากผู้อื่น
